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Experimentos > Policía científica: Detección de hemoglobina en manchas de sangre

Categorías: Reacciones químicas
Palabras clave: Luz, Reducción-Oxidación


Autor/es

Fina Guitart, Jordi Cuadros y Carme Artigas

Qué se pretende demostrar

  • La detección de rastros de sangre en manchas en la ropa, etc. Se utilizan dos reacciones de identificación para poder descartar interferencias y/o falsos positivos.
  • La reacción del luminol detecta la presencia de hierroIII presente en la sangre que ha estado en contacto con el aire. En medio básico y en presencia de un oxidante y un catalizador, como el hierro(III), el luminol se oxida a 3-aminoftalato excitado, que emite una luz de color azul característico (reacción de quimioluminiscencia).
  • La reacción de Bradford detecta la presencia de proteínas, como la hemoglobina de la sangre. La unión específica de los aminoácidos básicos de las proteínas a un colorante (azul de Coomassie) da color azul oscuro. Esta reacción permite descartar interferencias y/o falsos positivos en la detección de sangre con luminol (lejía, complejos de hierro(III)).


Dirigido a

  • Gran Público
  • Secundaria


Materiales necesarios

  • Un trozo de tejido blanco de algodón
  • Cartulina negra (una hoja)
  • Tijeras
  • Cinta adhesiva
  • placa de plástico con pozuelos
  • goteros de plástico
  • Placas de plástico con pozuelos

Reactivos:
  • Hidróxido de sodio
  • Luminol
  • Agua oxigenada 3%
  • Sangre de cerdo de matadero (5 mL)
  • Reactivo de Bradford
  • Colorante alimentario (rojo Ponceau)
  • Agua destilada
  • Solución de albúmina
  • Solución de glucosa
  • Solución de hexaciano ferrato(III) de amonio


Descripción

  • Preparación de las manchas de sangre sobre tejido
- Utilizar solamente sangre de animal que haya pasado los controles sanitarios de un matadero. 
- Preparar trozos pequeños de tejido blanco de algodón y añadir en unos una gota de sangre (dilución 1:10) y otros una gota de solución que contenga jugo de tomate, Ketchup u un colorante alimentario de color rojo sangre (rojo Ponceau)
 
  • Preparación de la disolución de luminol
Pesar 3 g de hidróxido sódico y 0,4 g de luminol. Enrasar con agua oxigenada del 3 % hasta 50 mL.

  • Construcción de la caja negra para visualizar la reacción del luminol
Cortar la cartulina de manera que se pueda construir un cubo sin una de las caras (la base)
Hacer un orificio de 2 cm de diámetro en la cara superior y pegar con una cinta adhesiva un trozo de cartulina circular para poder cerrar y abrir el orificio.

  • Reacción del luminol
- Colocar los trocito de tejidos manchados en una placa de plástico con pozuelos,
- Agregar una gota de la disolución de luminol sobre cada uno de los tejidos.
- Inmediatamente tapar con la caja negra y observar a través del orificio para observar la luminiscencia en caso de reacción positiva.
- Comparar los resultados con una mancha que contenga zumo de tomate o una disolución de colorante alimentario de color rojo sangre.
- Comparar los resultados con otro tipo de muestras, como una disolución de un complejo de hierro(III) (positivo) o una disolución (1/10) de lejía comercial (positivo que desaparece inmediatamente).

  • Preparación de la disolución de Bradford
Añadir 10 mL de reactivo comercial (solución de azul de Coomassie G-250 10 mg/L en etanol al 5 % y ácido fosfórico al 8,5 %) a 40 mL de agua.

  • Reacción de Bradford
- Añadir unas gotas de la disolución de Bradford sobre los trocitos de tela manchados de sangre o con otras manchas de color rojo.
- Las muestras que contengan sangre se volverán de color azul, dando positivo a la reacción de Bradford (color azul intenso)
- Comparar los resultados con otro tipo de muestras, como una disolución de glucosa (negativo) o una disolución de albúmina (positivo).


  • Dificultades
- La principal dificultad puede consistir en el hecho de trabajar con cantidades muy pequeñas y por lo tanto se requiere una manipulación cuidadosa.
- Los alumnos primero deben familiarizarse con las reacciones de identificación (luminol y Bradford) y distinguir entre resultados positivos y negativos, antes de comparar los resultados obtenidos con los trozos de tejido manchados o con rastros de sangre en manchas.


Existe alg�n riesgo

  • Es imprescindible utilizar solamente sangre de animal que haya pasado los controles sanitarios de un matadero.
  • Está totalmente prohibido trabajar con sangre humana
  • Utilizar guantes durante la realización del experimento
  • En el experimento se trabaja con cantidades muy pequeñas de reactivos, por lo tanto no supone una generación importante de residuos y por lo tanto no se genera peligro si se respetan las condiciones indicadas


Imágenes

 


Enlaces



Para saber m�s



Observaciones

  • En lugar de utilizar tejidos pueden realizarse las reacciones directamente con la sangre diluida (1:10) y con las soluciones de zumo de tomate o colorante alimentario de color rojo.
  • El experimento se ha descrito utilizando pedazos de tejido manchados de sangre o de colorantes rojos. Las reacciones de identificación de hemoglobina utilizadas detectan trazas de sangre, por lo tanto puede realizarse el experimento con tejidos que hayan estado en contacto con sangre, pero en los que aparentemente no haya ninguna mancha
  • Se recomienda realizar un ensayo control positivo de la prueba del luminol utilizando un compuesto que contenga un complejo de hierro(III)
  • Es muy recomendable plantear a los alumnos una pequeña investigación en la cual tengan que diseñar un experimento utilizando las muestras problema, controles positivos y negativos de la reacción de luminol y reacción de Bradford. Pedir a los alumnos que al ver las muestras de tejido emitan hipótesis y a que en cuanto realicen las reacciones de identificación, en función de los resultados de los ensayos realizados, elaboren una conclusión.